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小鼠骨髓来源的树突状细胞分离与诱导
树突状细胞(Dendritic cells, DC)是机体功能最强的专职抗原递呈细胞(Antigen presenting cells, APC),它能高效地摄取、加工处理和递呈抗原,是唯一能够显著刺激初始T细胞增值的抗原呈递细胞 (其他种类的APC如单核巨噬细胞,B细胞等仅能刺激已活化的或者记忆性的T细胞)。因此DC细胞是适应性T细胞免疫应答的唯一始动者,在肿瘤免疫中发挥着及其重要的作用。
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RAW264.7细胞AMPK基因敲除多克隆细胞系构建
CRISPR/Cas9 源自细菌及古菌中用以抵御病毒和外源 DNA 入侵的免疫调控系统 。 crRNA( CRISPR-derived RNA) tracrRNA( trans-activating RNA) 配对形成复合物能 特异识别基因组序列 , 引导 Cas9 核酸内切酶对目的片段进行切割 ,对这两种 RNA 进行二 合一优化获得 sgRNA( single-guide RNA) 同样能引导 Cas9 进行靶向切割。利用其特异 性靶向功能 ,可实现基因的精准编辑 ,包括基因敲除、敲入和点突变等等。该系统已被广泛 应用于斑马鱼、小鼠、大鼠、秀丽隐杆线虫、植物及细菌等多种生物体的基因编辑。
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内分泌及免疫、代谢相关疾病模型
内分泌系统疾病是内分泌腺或内分泌组织本身的分泌功能和(或)结构异常时发生的症候群。还包括激素来源异常、激素受体异常和由于激素或物质代谢失常引起的生理紊乱所发生的症候群。免疫系统疾病主要分为特异性免疫系统疾病和非特异性免疫系统疾病。特异性免疫系统疾病:针对某个器官、某个组织产生的自身抗体,造成特异性的免疫性疾病,如亚甲炎,即针对甲状腺产生抗甲状腺球蛋白抗体,作用在甲状腺上,造成甲状腺的功能损害引发的症状,如1型糖尿病,是针对胰岛细胞产生的抗体。非特异性免疫系统疾病:如风湿性疾病,风湿科主要研究弥漫性的结缔组织病,主要是针对全身各器官、各系统产生的抗体、结合补体,主要是以免疫反应为主,如系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、干燥综合征、皮肌炎、多肌炎、硬皮病,以及一大类的系统性血管炎,主要特点是弥漫性、全身性,且抑制性较强,与血管炎症密切相关。我司经过多年的经验累积,不断完善创新,多方验证和长期实践,建立了稳定可靠的动物模型库,可根据客户的需求提供各种稳定有效的动物模型,用来检测药物的有效性。
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木瓜蛋白酶诱导大鼠膝骨关节炎模型
膝骨性关节炎(knee osteoarthritis,KOA)是一种膝关节软骨退行性改变为主的慢性骨关节病,以关节软骨破坏、软骨下骨硬化和增生为主要病理特征,表现为关节疼痛、功能障碍等。在全球60岁以上的老年人中,约9.6%的男性和18%的女性患有KOA。KOA发病率逐年增高,老年患者甚至生活无法自理,成为社会和家庭的负担。目前,西医应用激素非甾体抗炎药等药物或人工关节置换治疗KOA。药物治疗虽能缓解症状,但存在不良反应较大,远期疗效不肯定,无法长期使用的缺点。而人工关节置换预后不良且费用高昂,给家庭带来极大的经济负担。因此,KOA的临床及实验研究尤为重要,而KOA模型研究为其作用机制、防治手段研究的前提,可为KOA的研究提供基础。
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Seahorse 细胞能量代谢检测实验常见问题说明
简介:使用 seahorse 仪器检测细胞能量代谢状况,具体包括细胞有氧呼吸和糖酵解。
原理:有氧呼吸和糖酵解是细胞内两条主要的能量生产途径,前者可通过加入不同的线粒体电子传递链药物来测得细胞呼吸氧耗率,后者则通过加入寡霉素抑制有氧呼吸来测得细胞产酸率。
用途:测量细胞能量代谢,细胞有氧呼吸情况,细胞糖酵解情况。
材料和仪器:
Seahorse XFe96 仪器;
Seahorse XF 细胞线粒体压力测定试剂盒 -
如何解决WB中产生的杂带
WB为何会产生杂带
在wb实验中很容易产生非特异性条带,大家首先的想法肯定就是抗体的原因。其实除了抗体因素,样本也是很容易造成非特异性条带的产生。下面我们主要从样本原因进行分析 -
贴壁细胞6大培养难题
贴壁细胞在培养时要贴附于培养(瓶)器皿壁上,细胞一经贴壁就迅速铺展,然后开始有丝分裂,并很快进入对数生长期。
贴壁细胞因其培养过程较为繁琐,所以培养时更容易出现问题。以下总结了贴壁细胞培养中常见的6种问题,并详细介绍原因和解决方法。